J9九游国际医药依托拥有实验动物使用许可证的实验动物中心进行合作，为您提供主要包括模型制备、受试物给药、标本采集、功能指标检测等技术服务。

服务目录号：#OGF-018

服务项目：辅助保护胃黏膜

服务内容：

1.急性胃粘膜损伤无水乙醇模型、急性胃粘膜损伤消炎痛模型、慢性胃溃疡模型（任选其一）

2.选用SD或Wistar 健康大鼠，单一性别，180－220 克，每组 8－12 只。

3.受试物设三个剂量组，其中一个应为人体推荐量的5 倍剂量组，并同时设置正常对照组。不同的损伤模型，还应设置相应的模型对照组。慢性溃疡模型应先造模，手术次日再分组。受试样品给予时间一般为14 —30 天，必要时可以延长至 45 天。

4.结果判定：数据可用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F 值，F 值<F0.05，结论：

各组均数间差异无显著性。F 值≥F0.05，即 P≤0.05，用多个实验组和对照组间均数的两两比较方法进行统计。对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计。若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。受试物一个或一个以上剂量组与模型对照组比较，急性胃粘膜损伤模型大体观察评分或大体观察评分与病理组织学检查评分显著降低，慢性胃溃疡模型的溃疡面积和/或体积显著减小，表明胃粘膜损伤明显改善，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。

客户提供：受试样品、阳性对照品

J9九游国际提交：详细研究报告

服务周期：3个月

服务目录号：#OGF-018-1

模型名称：急性胃粘膜损伤无水乙醇模型

动物随机分空白对照组、模型组和受试样品三个剂量组。各剂量组灌胃样品30 天后，全部动物严格禁食24 小时（不禁水），此期间亦禁止给予受试物。除空白对照外，所有试验组动物给予无水乙醇1.0mL/只，1 小时后处死动物，暴露完整胃，结扎幽门，灌注适量 10%福尔马林溶液，固定 20min，然后沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，展开胃粘膜，在体视解剖显微镜下或肉眼下用游标卡尺测量出血点或出血带的长度和宽度。因宽度所代表损伤的严重性远较长度大，故双倍积分。其评分标准见表1

观察指标：各实验组胃粘膜损伤程度以损伤发生率（%）、损伤积分指数和损伤抑制率（%）表示。损伤发生率（%）=某组出现出血或溃疡的大鼠数量／该组大鼠数量×100%；损伤积分指数 = 组损伤评分总和／组动物数量；损伤抑制率（%）= (A-B)/A´100%（A、B 分别为模型组与试验组的损伤积分）。

组织病理学观察及评分：大体检查完毕，将每只动物胃粘膜损伤最严重的部位切下，固定于10%甲醛溶液，常规制片，HE 染色，镜下观察。注意选择胃粘膜正横切面，包括粘膜全层的区域观察。评分方法：以充血、出血、粘膜细胞变性坏死在整个粘膜上皮层的累及程度分为5 级。充血权重为 1，出血权重为 2，上

皮细胞变性坏死权重为3，评分标准及病变总积分公式见表 2。

表2 急性胃粘膜损伤组织病理学检查评分标准

服务目录号：#OGF-018-2

模型名称：急性胃粘膜损伤无水乙醇模型

动物随机分空白对照组、模型组和受试样品三个剂量组，灌胃给予动物受试物30 天后，禁食不禁水24 小时，模型组和剂量组给予消炎痛 40mg/kg 一次性腹腔注射。5 小时后处死动物，剖腹将胃取出，结扎幽门和贲门，从十二指肠与幽门部结合处注入10%甲醛溶液 5 mL，固定 20 分钟后，沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，展开胃粘膜，用纸吸干，观察胃粘膜损伤程度。用游标卡尺测量胃出血或溃疡的最大长度及宽度，以出血或溃疡的最大长宽径作为损伤指标评分。消炎痛所致胃粘膜损伤的溃疡一般较小，肉眼观查以点状多见，其评分标准见表3

观察指标：各实验组胃粘膜损伤程度以损伤发生率（%）、损伤指数和损伤抑制率（%）表示。损伤发生率（%）= 某组出现出血或溃疡的大鼠数量／该组大鼠数量×100%；损伤指数 = 组损伤评分总和／组动物数量；损伤抑制率（%）=(A-B)/A´100%（A、B 分别为模型组与试验组的损伤积分）。

组织病理学观察及评分：同急性胃粘膜损伤无水乙醇模型。

服务目录号：#OGF-018-3

模型名称：慢性胃溃疡模型

醋酸注射法：将动物禁食不禁水24 小时，乙醚或水合氯醛或戊巴比妥钠麻醉后，消毒腹部，于剑突下切开腹腔，将胃轻拉出腹腔外，用微量注射器于胃幽门处浆膜下注射20－30mL 的 30%冰醋酸，缝合切口，术后正常喂食和水。第二天将手术后状态良好的动物按体重随机分为模型组和受试样品三个剂量组。各

剂量组按相应剂量灌胃，连续14 天。模型组灌胃蒸馏水或溶剂。禁食 24 小时后处死，取出整个胃浸泡于 10%的福尔马林溶液内，浸泡20 分钟后沿胃大弯剪开，洗净内容物，取腺胃区展开平铺于玻璃板上，用纸吸干溃疡内的水分，测量其面积和体积。溃疡面积和体积测量法：于带标尺的解剖显微镜下计数溃疡所占的方格数，换算成面积。然后用微量注射器将有色墨水注入溃疡内，将溃疡填满与周边平齐，读取微量注射器上刻度即为溃疡的体积。1.4.3.3.2 冰醋酸浸渍法：将动物禁食不禁水 24 小时，乙醚、异氟烷、巴比妥钠或水合氯醛麻醉后实施剖腹手术，消毒腹部，于剑突下切开腹腔，将牛津杯（内径5mm、长 10mm）垂直放置胃体部粘膜上，向管腔加入冰醋酸0.2mL，1.5 分钟后用棉签蘸出冰醋酸，缝合手术切口，术后正常喂食和水，第二天将手术后状态良好的动物按体重随机分组、给药，动物处置和测量等操作同上。